摘要：在新型抗球虫疫苗和药物研制中，体外培养技术可作为研究球虫发育机制以及高通量筛选抗球虫药物的重要技术平台。为寻找适合球虫入侵和发育的细胞培养体系，建立和优化了鸡胚肠上皮细胞的分离、培养技术。以表达黄色荧光蛋白的转基因柔嫩艾美耳球虫为模型，将其子孢子接种到鸡胚肠上皮细胞，观察其各阶段的发育过程，评估鸡胚肠上皮细胞作为艾美耳球虫体外培养系统的效率和有效性。结果显示，先后使用180目和500目孔径细胞筛分离鸡胚肠上皮细胞，培养得到的细胞具有典型的上皮细胞特征。转基因艾美耳球虫子孢子入侵鸡胚肠上皮细胞后66 h左右发育成第一代成熟裂殖体，78 h左右释放第一代裂殖子。转基因艾美耳球虫子孢子可在鸡胚肠上皮细胞中完成滋养体和裂殖体的发育，在培养的第5-6天，观测到少量的大配子及合子形态，表明艾美耳球虫可在肠上皮细胞中进行有性生殖和发育。该研究为艾美耳球虫发育相关研究提供了良好的技术支持，同时对其他肠道病原的研究也具有借鉴意义。
